Preparación dun xel de agarosa para a electroforese

Preparación de xel de agarosa para electroforese

Nota: use sempre luvas desbotables!

Instrucións paso a paso

Pesaxe de agarosa en po:use papel de pesar e unha balanza electrónica para medir 0,3 g de agarosa en po (baseado nun sistema de 30 ml).

Preparación do búfer TBST:pRepare 30 ml de tampón 1x TBST nun matraz Erlenmeyer de 100 ml.

Disolución de agarosa en po:pintroduza o po de agarosa no tampón TBST e agite ben.Metelosao microondas e quenta (normalmente durante 50 segundos, cuberto con papel de aluminio) ata que se disolva por completo.

Refrixeración e adición de nuclease:use luvas para retirar a mestura do microondas e deixar arrefriar lixeiramente en auga fría ata que estea quente (uns 60°C). Engade 2 µl de nuclease (substituto Eb) mentres axita para mesturar ben.

Preparación do molde de xel:

• Cmagra e seca obandexa de xel e dispositivo de fundición de xeldo tanque de electroforese.
•  Pencaixe o xelbandexano tanque interior e introduza o pente nunha posición fixa.
• Mestura a solución de xel de agarosa, arrefriada a uns 65 °C e bótaa con coidado sobrebandexa de xelnodispositivo de fundición de xel, estendéndoo lentamente ata formar unha capa de xel uniforme na placa de vidro.
• Déixao a temperatura ambiente ata que o xel se solidifique completamente.
• Retire suavemente o pente verticalmente e retire a cinta.
• Coloque o xelbandexano tanque de electroforese.

Importante: asegúrese de que non haxa burbullas de aire na zona dos dentes do pente. A superficie do líquido debe ser lisa e sen ondulacións.

Correndo o Gel

Cargando o xel

Despois de que o xel se solidifique, colócao no tanque de electroforese e verte o tampón de electroforese ata que o xel estea mergullado.

Preparación de mostras

• Colle o marcador e o tampón de carga da neveira.
• Engade 6 µl de tampón de carga ás mostras e mestura ben.
• Usando unha micropipeta, cargue lentamente as mostras nos grandes pozos do xel (coidado de non perforar o xel e non dispense todo o volume para evitar burbullas de aire).
• Cargue o marcador en calquera dos pequenos pozos (recorde a súa posición).

Inicio da electroforese

• Cubra o tanque de electroforese e inicie a electroforese inmediatamente despois de cargar o xel.
• Establece a tensión entre 60 e 100 V. As mostras migrarán do electrodo negativo (negro) ao electrodo positivo (vermello).
• A tensión máis alta acurta o intervalo de separación efectivo do xel de agarosa.
• Detén a electroforese cando o colorante azul de bromofenol alcanza aproximadamente 1 cm do bordo inferior da placa de xel.

Observación de resultados

Despois de separar as bandas, detén a electroforese, saca o xel e detéctao e fotografa directamente.

Use un sistema de imaxe en xel para fotografar e observar as bandas (comprobar se hai bandas para o marcador ou as mostras).

Despois de obter o teu mapa de banda de xel, busca o marcador. Segundo o marcador, podes determinar as bandas de destino.

Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) foron fabricados produtos de electroforese por máis de 50 anos. Presentamos aquí os nosos sistemas de electroforese horizontalxel de agarosaelectroforese.Escollesistemas de electroforese horizontalde Beijing liuyi para o seu experimento de electroforese en xel para axudar a súa investigación na industria da biotecnoloxía.

Ofrecemos diferentes modelos de tanques de electroforese horizontais para fundir e executar pequenosagarosaxeles a grandesagarosaxeles

Guía de selección da unidade de electroforese en xel inmerso horizontal

Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) especializouse na fabricación de instrumentos de electroforese durante máis de 50 anos co noso propio equipo técnico profesional e centro de I + D. Temos unha liña de produción fiable e completa, desde o deseño ata a inspección e o almacén, así como soporte de mercadotecnia. Os nosos principais produtos son a célula de electroforese (tanque/cámara), a fonte de alimentación de electroforese, o transiluminador LED azul, o transiluminador UV, o sistema de análise e imaxe de xel, etc. Tamén fornecen os instrumentos de laboratorio como o instrumento de PCR, o mesturador de vórtice e a centrífuga para o laboratorio.

Se tes algún plan de compra dos nosos produtos, non dubides en contactar connosco. Podes enviarnos unha mensaxe ao correo electrónico[correo electrónico protexido]ou[correo electrónico protexido], ou chámanos ao +86 15810650221 ou engade Whatsapp +86 15810650221 ou Wechat: 15810650221.

Escanee o código QR para engadir en Whatsapp ou WeChat.